Научный журнал
Успехи современного естествознания
ISSN 1681-7494
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,775

РЕГУЛЯТОРНЫЕ ПЕПТИДЫ ИЗ ВНУТРЕННИХ ОРГАНОВ ЖИВОТНЫХ ПОСЛЕ ОСТРОЙ КРОВОПОТЕРИ

Есаулова И.Н. 1, 2 Цыбиков Н.Н. 1 Тарнуев В.А. 3, 2 Гармаева О.Ж. 4, 3
1 ГБОУ ВПО «Читинская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России
2 БОУ ВПО «Иркутская государственная медицинская академия последипломного образования» Минздравсоцразвития России
3 АУ РБ Республиканский клинический госпиталь для ветеранов войн
4 ГБОУ ВПО «Читинская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России
Цитомедины – это биологически активные соединения, продуцируемые органами и тканями, способные влиять на течение физиологических и биохимических процессов в организме для поддержания гомеостаза. Экспериментально выявлено, что пептиды (цитомедины), выделенные из тканей печени и сердца животных, влияют на адгезивные свойства клеток крови – увеличивают количество лейкоцитарно-эритроцитарных (ЛЭА), тромбоцитарнo-эритроцитарных (ТЭА) и лимфоцитарно-тромбоцитарных (ЛТА) агрегатов. Феномен лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии является ярким примером тесной взаимосвязи иммунитета и гемостаза, являющихся составными частями единой интегральной клеточно­-гуморальной системы защиты организма.
гемостаз
кровопотеря
лимфоцитарно-тромбоцитарная адгезия
пептиды
резистентность организма
цитомедины
1. Aшмарин И.П., Королева С.В. Биоинформационный подход к исследованию функционального континуума // Успехи функциональной нейрохимии: сб. статей / ред. С.А. Дамбинова, А.В.Арутюнян. – СПб., 2003. – С. 83–93.
2. Боль. Молекулярная нейроиммуноэндокринология и клиническая патофизиология / К.И. Произаев, А.Н. Ильницкий, И.В. Князькин и др. – СПб.: Изд-во ДЕАН, 2006. – 304 с.
3. Витковский Ю.А., Кузник Б.И., Солпов А.В. Феномен лимфоцитарно-тромбоцитарного розеткообразования // Иммунология. – 1999. – № 4. – С. 35–37.
3. Клигуненко Е.Н., Кравец О.В. Интенсивная терапия кровопотери. – М.: МЕДпресс-инфом, 2005. – 112 с.
4. Кузник Б.И. Клеточные и молекулярные механизмы регуляции системы гемостаза в норме и патологии: монография. – Чита: Экспресс-изд-во, 2010. – 832 с.
5. Кузник Б.И., Цыбиков Н.Н., Витковский Ю.А. Единая клеточно-гуморальная система защиты организма // Тромбоз, гемостаз и реология. – 2005. – № 2. – С. 3–16.
6. Кузник Б.И., Хавинсон В.Х., Морозов В.Г. Пептидные биорегуляторы. – М.: Вузовская книга, 2004. – 402 с.
7. Кузник Б.И., Витковский Ю.А., Солпов А.В. Адгезивные молекулы и лейкоци­тарно-тромбоцитарные взаимодействия // Вестник гематологии. – 2006. – Т. II, № 2. – ­С. 42–55.
8. Солпов А.В. Механизмы лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии: дис…канд. мед. наук. – Чита, 2005. – 146 с.
9. Shenkman B., Brill G., Solpov A., Vitkovsky Yu., Kuznik B. CD4 + lymphocytes require platelet for adhesion to immobilized fibronectin in flow: Role of β1 (CD29)-, β2 (CD18) related integrins and non-integrin receptors // Cellular Immunology. – 2006. – Vol. 11. – P. 520–527.

Кровопотеря представляет собой комплекс компенсаторных и патологических реакций, возникающих в ответ на кровотечение [4]. К адаптивным механизмам компенсации кровопотери относят активацию свертывающей системы крови и процессы тромбообразования, реакции со стороны сердечно-сосудистой системы, восстановление белкового состава крови, устранение дефицита форменных элементов [2, 5].

Известно, что кровопотеря сопровождается активацией системы иммунитета, что проявляется в появлении активированных лимфоцитов, увеличение уровня антител, активацией реакции неспецифического иммунитета [5, 7]. Основное место в регуляции системы иммунитета отводится медиаторам в том числе, щелочным полипептидам – цитомединам, которые являются пептидами межклеточной регуляции и обеспечивают гомеостаз организма. Последние образуются в клетках различных органов в результате катепсинового протеолиза, проникают в жидкие среды организма и способны специфическим образом через рецепторы воздействовать на лимфоциты.

Многочисленными исследованиями установлено, что самые различные форменные элементы крови способны взаимодействовать друг с другом, образуя агрегаты. В частности, все без исключения виды лейкоцитов способны вступать во взаимодействие с тромбоцитами и кровяные пластинки, активируясь, могут присоединять к себе эритроциты [5, 6]. Одним из перспективных направлений исследования адаптационных реакций организма в ответ на острую кровопотерю является изучение свойств эндогенных пептидов (цитомединов), продуцируемые органами, тканями и клетками, способные вмешиваться в реализацию самых различных функций организма [1, 2].

Цель работы: изучить биологические свойства пептидов, выделенных из печени и сердца животных, перенесших острую кровопотерю на адгезивные свойства клеток крови.

Материал и методы исследования

Эксперименты проведены на 20 животных (бараны). Все животные были разделены на 2 группы: опытные (10 баранов), которым пунктировали яремные вены и извлекали кровь в объеме равной 30 % ОЦК за 5 дней до забоя и контрольные без предварительного кровопускания (10 баранов). Забой проводился в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение 4 к Приказу МЗ СССР № 755 от 12.08.1977). Для получения цитомединов были взяты внутренние органы баранов – ткани печени и сердца. Выделение цитомединов проводилось методом уксусно-кислой экстракции с последующим осаждением комплекса полипептидов ацетоном (В.Г. Морозов и В.Х Хавинсон, 1999).

Цитомедины, полученные из печени и сердца баранов, которым за пять дней до забоя вскрывались яремные вены и выводилась кровь в объеме равной 30 % ОЦК, были названы опытными. Контрольные цитомедины были получены из печени и сердца животных без предварительного кровопускания.

Нами проводилось исследование биологической активности цитомединов на 15 образцах крови доноров в возрасте от 18 до 25 лет (средний возраст 19,3 ± 1,8 года), не имеющих соматических, психических заболеваний.

Исследуемые пептиды, в конечной концентрации 10 мкг/мл, инкубировали с цитратной кровью доноров 60 минут при 37 °С, затем центрифугировали со скоростью 3000 об/мин в течение 10 минут. Количество агрегатов форменных элементов крови оценивали по методу Д.И. Бельченко (1993).

Полученные данные были обработаны статистически общепринятыми методами с применением пакета прикладной программы «BIOSTAT» и программы статистического анализа Microsoft Excel, версия XP. Исследуемые параметры приведены в виде средних величин со стандартным отклонением М ± SD, где M – среднее значение, SD – среднее квадратичное отклонение. Статистическую значимость различий оценивали по критерию Манна-Уитни. Изменения считались статистически значимыми при р < 0,05.

Результаты исследования и их обсуждение

Известно, что при повреждении тканей возникает тесное взаимодействие между отдельными лейкоцитами, тромбоцитами и эндотелием сосудов [8, 10]. Высвобождающиеся из активированных и поврежденных эндотелиальных клеток биологически активные вещества способны стимулировать адгезивную и агрегационную функцию тромбоцитов. Не остаются безучастными лейкоциты, которые способны адгезировать и образовывать лейкоцитарно-тромбоцитарных агрегатов[3, 8, 9].

Лейкоциты также могут образовывать розетки друг с другом и с эритроцитами [5]. В физиологических условиях в кровотоке в небольших количествах происходит формирование разнообразных агрегатов клеток крови лимфоцитарно-тромбоцитарных (ЛТА), эритроцитарно-тромбоцитраных (ЭТА) и лейкоцитарно-эритроцитарных (ЛЭА). Физиологический смысл в формировании розеток состоит в том, что с одной стороны, микроагрегаты форменных элементов передают определенный гемостатический потенциал организму, а с другой стороны, вероятно, в агрегатах происходит взаимоактивация клеток и усиление их физиологических функций. Совершено иная картина развивается при массивном образовании розеток в патологии. Количество появляющихся лейкоцитарно-эритроцитарных агрегатов при стенокардии, по сравнению с нормой, увеличивается в 12 раз, а при остром инфаркте миокарда в 26 раз. В десятки раз может возрастать содержание агрегатов при неотложных состояниях [5]. Безусловно, при этом происходит блок микроциркуляции, так как крупные агрегаты не способны проходить через капилляры и нарушают микроциркуляцию. Особенно патофизиологичны лейкоцитарные агрегаты, так как клетки активируются с выделением агрессивных лизосомальных ферментов. Поскольку предпочтительным местом образования этих агрегатов является венозное русло, то основными «органами-мишенями» являются легкие, печень, сердце. Поэтому, понятен наш интерес к изучению влияния пептидов из печени и сердца на формирование ЛТА, ЭТА и ЛЭА.

Нами установлено (табл. 1), что пептиды, выделенные из тканей печени интактных и опытных животных, увеличивают ЛТА (р1 < 0,01). Следует подчеркнуть, что пептиды опытных животных в большей степени увеличивают количество ЛТА, ЭТА и ЛЭА (р1 < 0,05).

Аналогичные результаты получены при исследовании пептидов сердца экспериментальных животных (табл. 2).

Оказалось, что пептиды, выделенные из сердца интактных животных (см. табл. 2), увеличивают количество ЛТА (р1 < 0,01), ЭТА (р1 < 0,05) и ЛЭА (р1 < 0,01) и этот эффект значительно усиливается при добавлении пептидов, выделенных из сердца животных, перенесших острую кровопотерю.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют в пользу способности пептидов, особенно животных перенесших острую кровопотерю, усиливать синтез и экспрессию адгезивных молекул на мембранах форменных элементов крови, что проявляется в увеличении количества розеток. В целом, такую реакцию следует признать адаптивной, повышающей общую резистентность организма, так как в агрегатах идет взаимоактивация клеток, вследствие чего повышается их функциональная активность.

Таблица 1

Влияние пептидов из печени животных на ЛТА, ЭТА и ЛЭА (M ± SD)

Изучаемый показатель (число агрегатов на 100 кл)

Кровь доноров

Физиологический раствор (контроль)

n = 15

Контрольные пептиды (опыт I)

n = 15

Опытные пептиды(опыт II)

n = 15

Лимфоцитарно-тромбоцитарные агрегаты

10,57 ± 1,9

15,0 ± 1,41

р1 < 0,01*

16,29 ± 1,11

р1 < 0,01*

р2 < 0,05

Эритроцитарно-тромбоцитарные агрегаты

1,71 ± 0,76

2,29 ± 0,49

р1 < 0,05

4,39 ± 0,38

р1 < 0,05

р2 < 0,05

Лейкоцитарно-эритроцитарные агрегаты

1,57 ± 0,53

3,86 ± 1,07

р1 < 0,05

4,86 ± 0,69

р1 < 0,05

р2 < 0,05

Примечания: р1 – уровень значимости различий показателей между контролем и опытом I, между контролем и опытом II;

р2 – уровень значимости различий показателей между опытом I и опытом II;

* – значимые отличия.

Таблица 2

Влияние пептидов из сердца животных на ЛТА, ЭТА и ЛЭА (M ± SD)

Изучаемый показатель (число агрегатов на 100 кл)

Кровь доноров

Физиологический раствор (контроль)

n = 15

Контрольные пептиды (опыт I)

n = 15

Опытные пептиды (опыт II)

n = 15

Лимфоцитарно-тромбоцитарные агрегаты

10,57 ± 1,9

14,29 ± 1,8

р1 < 0,01*

19,14 ± 2,34

р1 < 0,01*

р2 < 0,05*

Эритроцитарно-тромбоцитарные агрегаты

1,71 ± 0,76

2,19 ± 0,49

р1 < 0,05*

8,29 ± 0,39

р1 < 0,05*

р2 < 0,05*

Лейкоцитарно-эритроцитарные агрегаты

1,57 ± 0,53

5,86 ± 1,07

р1 < 0,01*

10,29 ± 1,49

р1 < 0,05*

р2 < 0,01*

Примечание: условные обозначения те же, что и в табл. 1

Выводы

1. Цитомедины, полученные из печени и сердца интактных и, в большей степени, перенесших кровопотерю животных, увеличивают лимфоцитарно-тромбоцитарную адгезию.

2. Пептиды из печени животных, подвергшихся кровопусканию, повышают число лейкоцитарно-эритроцитарных агрегатов.


Библиографическая ссылка

Есаулова И.Н., Есаулова И.Н., Цыбиков Н.Н., Тарнуев В.А., Тарнуев В.А., Гармаева О.Ж., Гармаева О.Ж. РЕГУЛЯТОРНЫЕ ПЕПТИДЫ ИЗ ВНУТРЕННИХ ОРГАНОВ ЖИВОТНЫХ ПОСЛЕ ОСТРОЙ КРОВОПОТЕРИ // Успехи современного естествознания. – 2012. – № 12. – С. 16-18;
URL: https://natural-sciences.ru/ru/article/view?id=31191 (дата обращения: 28.03.2024).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1,674